DNA的扩增聚合酶链反应（PCR）是一种用于分子生物学的既定过程。PCR技术在医学和传染病诊断，取证和研究应用方面取得了长足的进步。有关治疗选择和临床功效的决策通常基于对患者细胞的DNA和RNA分析。确保适当的污染控制可以确保临床医生获得最佳结果。
The most common causes of PCR contamination:
- 错误的实验室设置和不正确的工作流程
- 操作员污染
- 样品分离失败
- Improper sterilization of lab equipment
最佳PCR工作流程的实验室设置
Creating a proper lab environment and establishing a unidirectional workflow are two ways to prevent PCR contamination. To ensure proper facilities control, quality assurance personnel will establish a documented standardized protocol specific to the size of their lab space and available equipment. Personnel should be carefully trained and provided with access to written procedures.
这个单向工作流程涉及以下5种最佳实践：
- Establish separate work areas or rooms for each PCR reaction step
- NEVER return previously processed tubes to preceding work area or room
- 主混合应准备并在反应容器中等分，然后移动到相邻的隔离区域
- DNA模板绝不能在准备主混合的区域中存在
- 切勿使用未放大样品或未使用的试剂存储的完全放大的反应管
虽然大型实验室的奢侈品是在设施中为每个PCR反应创建单独的房间，但小型实验室使用PCR引擎盖或类似的死空气盒（无气吹风机的引擎盖）来创建预防污染所需的分离。
避免使用PCR工作站的操作员污染
The biggest contributors of contamination in any lab are operators. To mitigate this, it is important that operators observe the established unidirectional workflow and maintain proper lab gear. Follow these tips to eliminate operator contamination:
- 人员必须始终戴手套，并定期换上手套
- Operators must practice due diligence in maintaining a clean work surface
- Operators must observe established unidirectional workflow protocol
PCR Hoods, Sterilization and Operator Safety
PCR引擎盖可以配备抗微生物紫外线灯，该灯以设定的间隔操作以对工作环境进行消毒。UV-C暴露可能是有害的，因此工人应在紫外线灯时离开房间。但是，如果不可能，在这些灯下工作时，实验室人员必须始终佩戴适当的防护装备。重要的是，配备紫外线灯的引擎盖是由适当的抗紫外线材料制成的。
- PCR reactions should be performed in a separate PCR-reaction hood
- 整个引擎盖的工作表面以及移液器应用1:10或1:20的漂白剂进行消毒，然后用70％乙醇冲洗
- 每个PCR反应引擎盖都应包含专用的设备（移液器，离心机，塑料实验室），不应卸下和/或转移到另一个引擎盖上
Recommended Pipettes in PCR Hoods
选择带有屏障尖端的正置放置移液器，以防止从一个样本到另一个样本的携带。这些移液器非常适合使用挥发性液体和高度粘性样品，因为它们具有一次性的微传输尖端。正位移不仅提供了更准确性，而且与空气置换移液器相比，它们还提供了优越的样品保护。
Conclusion
PCR反应中的污染可以通过遵循基本实验室的最佳实践并纳入特定于敏感PCR应用的一些专业技术来控制。理想情况下，用于研究遗传物质的实验室设备不应用于其他实验。即使有适当的清洁协议，仍然有交叉污染的机会。通过以下详细的，有记录的协议来提高效率和准确性。
阅读更多about Terra Universal’s PCR Workstations and Equipment.
照片由gemmerich，，，，
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